用途:
用于細菌的動(dòng)力、吲哚和脲酶復合生化實(shí)驗。
配方:(g/L)
蛋白胨 | 28.0 |
磷酸二氫鉀 | 1.0? |
酚紅 | 0.005? |
酪胨 | 2.0? |
氯化鈉 | 5.0? |
瓊脂 | 4.0? |
附加試劑:
40%尿素溶液????????????????????????????50mL/L
Kovacs靛基質(zhì)試劑
原理:
蛋白胨和酪胨提供碳氮源、維生素和生長(cháng)因子;磷酸二氫鉀是緩沖劑;氯化鈉維持均衡的滲透壓;酚紅是酸堿指示劑;瓊脂是凝固劑。
動(dòng)力實(shí)驗:檢驗細菌的動(dòng)力,穿刺接種培養基后,如果細菌沿穿刺線(xiàn)擴散生長(cháng)即為陽(yáng)性,反之為陰性。
吲哚實(shí)驗:細菌分解蛋白胨中的色氨酸,生成的吲哚可與對二甲基氨基苯甲醛結合,形成玫瑰吲哚,為紅色化合物。細菌培養后,滴加靛基質(zhì)試劑后,顯紅色的是陽(yáng)性,不變色的為陰性。
脲酶實(shí)驗:細菌能分解尿素的可使培養基pH升高,酚紅是酸堿指示劑,pH升高后培養基整體變紅,為陽(yáng)性,反之為陰性。
用法:
1、稱(chēng)取40.0g于1L蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,121℃高壓滅菌15min。
2、冷卻至55℃,無(wú)菌加入50mL40%的尿素溶液,混勻,分裝試管后備用。
注意事項:
培養基基礎冷卻至55℃左右,加入附加試劑,避免溫度過(guò)高,附加試劑失效。
培養基質(zhì)控:
觀(guān)察動(dòng)力試驗結果:滴加2-3滴甲基紅試劑,立刻觀(guān)察,出現紅色為陽(yáng)性,不變色為陰性;
觀(guān)察吲哚試驗結果:滴加Kovacs靛基質(zhì)試劑,10min-30min內觀(guān)察結果,出現紅色為陽(yáng)性,不變色為陰性。如為陰性應放在36℃±1℃繼續培養4h后再觀(guān)察。
觀(guān)察脲酶實(shí)驗結果:培養基整體變玫紅則為陽(yáng)性,反之為陰性
