用途:
用于細菌的賴(lài)氨酸、吲哚和動(dòng)力復合生化試驗。
配方:(g/L)
蛋白胨 | 12.8? |
酵母粉 | 3.0? |
葡萄糖 | 1.0? |
L-賴(lài)氨酸鹽酸鹽 | 10.0? |
L-色氨酸 | 0.5? |
溴甲酚紫 | 0.02? |
瓊脂 | 2.7? |
附加試劑:
Kovacs氏靛基質(zhì)試劑
原理:
蛋白胨、酵母粉在培養基中作為基礎營(yíng)養物質(zhì)提供碳源,氮源,維生素及礦質(zhì)元素;L-色氨酸作為色氨酸水解酶的底物;葡萄糖作為可發(fā)酵的碳源能促進(jìn)菌體細胞的生長(cháng);L-賴(lài)氨酸鹽酸鹽作為氨基酸酶代謝的底物;溴甲酚紫作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑
細菌代謝產(chǎn)生的色氨酸酶,水解色氨酸產(chǎn)生吲哚(又名靛基質(zhì)),吲哚本身沒(méi)有顏色,在加入對二甲氨基苯甲醛試劑后,與之作用生成分子結構為醌型的玫瑰紅色物質(zhì)。
某些細菌在L-賴(lài)氨酸存在的情況下,誘導產(chǎn)生賴(lài)氨酸脫羧酶使L-賴(lài)氨酸脫羧,產(chǎn)生一種二胺的化合物——尸胺,該物質(zhì)在厭氧的條件下穩定,由于氨基酸脫羧,使得培養基的pH值升高(克服培養基本身的酸性pH條件及代謝葡萄糖產(chǎn)生的酸),使得培養基中的顏色變成紫色,而不產(chǎn)賴(lài)氨酸脫羧酶的細菌由于代謝葡萄糖產(chǎn)酸使得培養基顏色變成黃色。
用法:
稱(chēng)取30.0g于1L蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝于小試管中,每管5mL,121℃高壓滅菌15min,制成高層斜面備用。
注意事項:
無(wú)
培養基質(zhì)控:
觀(guān)察吲哚試驗結果:滴加靛基質(zhì)試劑2-3滴,立即觀(guān)察結果。出現紅色為陽(yáng)性,不變色為陰性。
觀(guān)察賴(lài)氨酸脫羧酶實(shí)驗結果:紫色為陽(yáng)性,黃色為陰性。
觀(guān)察動(dòng)力試驗結果:穿刺線(xiàn)周?chē)囵B基有混濁生長(cháng)為陽(yáng)性,否則為陰性。
