用途:
用于霍亂弧菌的生化鑒定。(SN標準)
配方:(g/L)
牛肉粉 | 3.0 |
?蛋白胨 | 15.0? |
乳糖 | 5.0? |
硫酸亞鐵 | 0.2? |
硫代硫酸鈉 | 0.30? |
酚紅 | 0.024? |
酵母粉 | 3.0? |
蛋白胨 | 5.0? |
葡萄糖 | 1.0? |
氯化鈉 | 20.0? |
瓊脂 | 12.0? |
附加試劑:
????無(wú)
原理:
牛肉粉、酵母粉、?蛋白胨、蛋白胨在培養基中作為基礎營(yíng)養物質(zhì)提供菌體細胞生長(cháng)所需的氮源、碳源、維生素等;雙糖(乳糖、葡萄糖)為可發(fā)酵的碳源,細菌代謝其產(chǎn)酸產(chǎn)氣等;硫酸亞鐵及硫代硫酸鈉分別作為產(chǎn)硫化氫的指示劑和底物;高含量氯化鈉可滿(mǎn)足弧菌生長(cháng)嗜鹽的要求同時(shí)可以抑制不耐鹽的細菌生長(cháng);酚紅作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑。
在該培養基上可以觀(guān)察到三種基本的發(fā)酵類(lèi)型:①僅發(fā)酵葡萄糖:斜面呈紅色(堿)/底層呈黃色(酸)。斜面呈紅色,說(shuō)明葡萄糖被利用,培養18h-24h后,低濃度(0.1%)的葡萄糖完全被利用了,細菌開(kāi)始利用培養基中的蛋白胨作為生長(cháng)的養料。蛋白胨分解釋放氨,同時(shí)葡萄糖分解產(chǎn)生的酸部分揮發(fā),最終在培養基斜面中顯出堿性pH反應(紅色),然而在培養基底部,由于氧張力較低,分解葡萄糖產(chǎn)生的酸未揮發(fā)仍在底部保持酸性反應(底部呈黃色);②同時(shí)發(fā)酵葡萄糖和乳糖:斜面呈黃色(酸)/底層呈黃色(酸):葡萄糖和乳糖均被利用,由于乳糖的量較大,18h-24h內,仍有部分乳糖未分解完,斜面仍然呈酸性反應(黃色);③均不發(fā)酵葡萄糖和乳糖:由于僅利用蛋白胨產(chǎn)堿使斜面和底部均呈紅色。
該培養基另一個(gè)鑒別系統是細菌產(chǎn)硫化氫指示劑,第一步細菌在酸性環(huán)境下利用培養基中的無(wú)機鹽硫代硫酸鈉產(chǎn)生硫化氫氣體,該氣體是一種無(wú)色氣體,它與培養基中另外一種無(wú)機鹽硫酸亞鐵種的亞鐵離子反應生成黑色不容性物質(zhì)硫化亞鐵。因此細菌產(chǎn)硫化氫可由培養基變黑判斷。此外,由于黑色硫化亞鐵沉淀可以掩蓋在底部產(chǎn)生的酸性反應,但由于硫化氫生成需要在酸性環(huán)境下進(jìn)行,因此產(chǎn)生了硫化氫,即使酸性反應未被觀(guān)察到,也是存在的。
用法:
稱(chēng)取64.5g于1L蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝,121℃高壓滅菌15min,制成高層斜面備用。
注意事項:
????無(wú)
培養基質(zhì)控:?
