最近,檢測圈的一個(gè)傳聞引起檢測大神們的瘋狂討論—沙門(mén)氏菌在VRBA內的菌落是紅色的!從原理上來(lái)說(shuō),這是不可能的!從傳聞來(lái)看,又像是真實(shí)存在的!為了破解這個(gè)謎題,我們做了相關(guān)的驗證試驗。
首先我們要了解一下VRBA培養基的成分及沙門(mén)氏菌的生化特性。
VRBA及沙門(mén)氏菌生化原理剖析
先來(lái)看VRBA培養基的組成成分(圖1)及原理:
圖1? VRBA的組成成分
VRBA培養基中含有乳糖和中性紅。大腸菌群可發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸,引起pH值的變化,中性紅作為酸堿指示劑使菌落變紅;酸與膽鹽結合形成膽酸鹽沉淀,故菌落周?chē)鷷?huì )有紅色的膽酸鹽沉淀環(huán)。
所以大腸菌群菌落變紅是由于發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸導致的!
了解了菌落變紅的原理,我們再來(lái)看一下沙門(mén)氏菌的生化特性:
圖2? 三糖鐵試驗結果
從三糖鐵的試驗結果(圖2)看,沙門(mén)氏菌不能利用乳糖,只能利用葡萄糖,而VRBA 的成分中并沒(méi)有葡萄糖!從原理上分析,沙門(mén)氏菌在VRBA上不會(huì )形成紅色菌落。所以傳聞會(huì )是真的么?
試驗驗證
?首先,我們采用涂布法,在VRBA表面接種沙門(mén)氏菌。結果發(fā)現,沙門(mén)氏菌在VRBA表面呈現大的無(wú)色菌落(圖3)。這符合沙門(mén)氏菌的特征,沙門(mén)氏菌一般不發(fā)酵乳糖,但在有氧條件下分解蛋白胨產(chǎn)堿,所以在VRBA表面形成大的無(wú)色菌落。
?燃鵝,我們繼續采用傾注法,在VRBA內部接種沙門(mén)氏菌。結果發(fā)現,沙門(mén)氏菌在VRBA內部形成的小小菌落(圖4)竟然是紅色的!紅色的??!紅色的?。?!
? 為此我們做了原料的排查試驗,采用去掉酵母浸粉成分的VRBA,以?xún)A注法接種沙門(mén)氏菌。結果發(fā)現,沙門(mén)氏菌在VRBA內部形成小菌落是無(wú)色的了(圖5黃圈里的菌落)。
圖3? 腸炎沙門(mén)氏菌ATCC13076涂布接種
圖4? 腸炎沙門(mén)氏菌ATCC13076傾注接種
圖5? 腸炎沙門(mén)氏菌ATCC13076傾注接種去掉酵母粉后的VRBA
酵母浸粉含糖是正常的么?
圖6? 各品牌的比對試驗
? ? ??至此,所有的疑問(wèn)都已解開(kāi)。原來(lái)沙門(mén)氏菌真的會(huì )在VRBA內部形成紅色菌落,但在大部分品牌VRBA上沙門(mén)氏菌菌落很小,與典型大腸菌群還是比較好區分的,且BGLB驗證時(shí)很容易排除。
參考文獻
1、Difco&BBL Mannal: Second Edition【M】United States of America, 2009
2、張曉桐等,酵母提取物提取工藝及應用的研究進(jìn)展【J】中國調味品,2019,002(044):160-163
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