? ?靛基質(zhì)試驗（indole test）是微生物檢驗的常用生化鑒定項目。反應原理是：蛋白胨中的色氨酸被細菌產(chǎn)生的色氨酸酶水解，產(chǎn)生吲哚，在加入對二甲氨基苯甲醛試劑（靛基質(zhì)試劑）后，與之作用生成醌類(lèi)結構的玫瑰紅色物質(zhì)。

? ? ? ? 最近有很多小伙伴咨詢(xún)小編關(guān)于志賀氏菌檢驗中靛基質(zhì)試驗的問(wèn)題。在GB 4789.5－2012《食品安全國家標準　食品微生物學(xué)檢驗　志賀氏菌檢驗》中，關(guān)于志賀氏菌的生化描述如下：

? 其中的靛基質(zhì)試驗除D群宋內氏志賀氏菌為明確陰性結果外，其他志賀氏菌為多數陰性或者遲緩陽(yáng)性，其中對于福氏志賀氏菌描述為遲緩陽(yáng)性。

? ? ? ? GB 4789.5－2012《食品安全國家標準　食品微生物學(xué)檢驗　志賀氏菌檢驗》附錄Ａ中，對于試驗方法是這樣描述的：

? ?

? ?靛基質(zhì)試驗，本來(lái)是挺簡(jiǎn)單的一個(gè)生化鑒定項目，但是大多數小伙伴都會(huì )糾結：志賀氏菌這個(gè)靛基質(zhì)試驗究竟該培養多久？這個(gè)必要時(shí)，是什么意思？

?《伯杰細菌鑒定手冊》（第八版）中描述“福氏志賀氏菌血清型6不產(chǎn)生吲哚，另外一些血清型產(chǎn)生吲哚不穩定”。

? ?因此大家對于“不穩定”、“遲緩陽(yáng)性”這些描述有以下疑慮：

? 1、是否多數福氏志賀氏菌都是遲緩陽(yáng)性？

? 2、遲緩陽(yáng)性需要培養多長(cháng)時(shí)間會(huì )出現陽(yáng)性反應？

? 3、按照成品生化試劑培養時(shí)間進(jìn)行培養是陽(yáng)性還是陰性？

? 帶著(zhù)這些問(wèn)題，小編進(jìn)行了相應的驗證試驗，從試驗中尋找這些問(wèn)題的答案。

? 我們使用不同菌種保藏中心的四株福氏志賀氏菌進(jìn)行試驗。用平板上新鮮純化的菌苔制備0.5麥氏單位濁度菌懸液，每支生化管接種0.2 mL菌懸液（同時(shí)接種多管平行），36 ℃培養。每天觀(guān)察結果（觀(guān)察結果時(shí)，滴加靛基質(zhì)試劑1～2滴）。

? 試驗結果如下：

備注：1、“+”紅色；“-”淡黃色。2、CICC10865和CMCC(B)51572為同一菌株在不同菌種保藏中心的不同編號。

? ? ? ? ?試驗結果如下圖所示：

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36℃培養24 h? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?36℃培養48 h

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36℃培養72 h? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?36℃培養4 d? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 36℃培養5 d??

? ? ? ? ?為了避免試劑原因造成結果偏差，我們同時(shí)使用國內三個(gè)不同廠(chǎng)家的色氨酸肉湯（蛋白胨水）進(jìn)行驗證，四株福氏志賀氏菌的試驗結果與上述結果一致。

? 根據試驗結果，現在我們回答最初的問(wèn)題：

? 1、?福氏志賀氏菌靛基質(zhì)試驗確實(shí)是遲緩陽(yáng)性。

? 2、?福氏志賀氏菌靛基質(zhì)試驗遲緩陽(yáng)性的培養時(shí)間需要48 h及以上。

? 3、?開(kāi)展志賀氏菌靛基質(zhì)試驗，一般培養時(shí)間是18 h～24 h，不超過(guò)48 h。在這個(gè)時(shí)間范圍內，福氏志賀氏菌一般都獲得陰性結果。

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? ? ? ? ?參考文獻：

? ?1、?GB 4789.5－2012《食品安全國家標準　食品微生物學(xué)檢驗　志賀氏菌檢驗》

? ?2、?《伯杰細菌鑒定手冊》（第八版）