
1、?? 嘔吐毒素(DON)簡(jiǎn)介
脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(Deoxynivalenol,簡(jiǎn)寫(xiě)為:DON)是一種單端孢霉烯族化合物。它主要來(lái)源于鐮刀菌屬,其中禾谷鐮刀菌和黃色鐮刀菌是主要的產(chǎn)毒菌種。脫氧雪腐鐮刀菌烯醇,與3-乙酰和15-乙酰脫氧雪腐鐮刀菌烯醇,共同組成劇毒分子,被認為是造成免疫系統和神經(jīng)系統疾病的重要因素。DON?毒素污染糧食的情況非常嚴重,許多糧谷類(lèi)都會(huì )受到DON毒素的污染,如小麥、玉米、燕麥和大麥。被DON毒素污染的小麥更易發(fā)生小麥赤霉病,谷物的活力以及農產(chǎn)品的營(yíng)養價(jià)值也很大程度降低,對農業(yè)經(jīng)濟造成嚴重的損失。由于DON?毒素性質(zhì)穩定,一般的食品生產(chǎn)加工過(guò)程很難破壞其毒性,進(jìn)入食物鏈后對人和動(dòng)物的健康造成威脅。?DON?毒素具有很強細胞毒性,對生長(cháng)較快的細胞例如淋巴細胞、胸腺細胞、骨髓造血細胞等均具有明顯的毒性作用。人食用了被DON?毒素污染的食品后,主要表現為惡心、腹瀉、嘔吐等癥狀。而動(dòng)物常有的癥狀為體重減輕、厭食。雖然它的毒性較同族其它真菌毒素小,但由于它廣泛存在并大量污染糧食,對人畜構成很大危害。聯(lián)合國糧農組織和世界衛生組織1973年聯(lián)合召開(kāi)的第三次食品添加劑和污染物會(huì )議上,單端孢霉烯族毒素被定為最危險的自然發(fā)生食品污染物。列入國際研究的優(yōu)先地位。世界上絕大多數政府對人類(lèi)及動(dòng)物食物中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的含量制定了嚴格的限定。因此,準確快捷地檢測出商品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇旳含量極其重要。

圖1?嘔吐毒素結構圖
2、嘔吐毒素(DON)的限量標準? ??? 根據《食品中真菌毒素限量》(GB 2761-2017)標準: 規定谷物及其制品中的嘔吐毒素(DON)?的限量為1000μg /kg。
3、酶聯(lián)免疫法檢測嘔吐毒素(DON)???定量檢測原理基于酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)。酶標板微孔包被有DON特異性抗體,DON標準品或樣品以及DON-HRP酶結合物(檢測溶液)加入包被有抗體的微孔中。DON-HRP酶結合物與標準品或樣品中的DON競爭結合DON抗體。未結合的DON-HRP酶結合物在洗滌步驟中洗去。加入底物溶液后,產(chǎn)生藍色物質(zhì)。加入終止液終止反應,藍色物質(zhì)變成黃色。450nm下測定吸光值,吸收光的強度與樣品和標準品中DON的濃度成反比。

4、免疫金標快速試紙條檢測嘔吐毒素DON? ? 定量側向層析檢測基于免疫層析測定原理。微孔中有耦合在膠體金上的DON特異性抗?體。在微孔中加入待測液,反復吹打形成懸浮混合液后開(kāi)始孵育。在孵育過(guò)程中,DON(若存在)與膠體金抗體結合,達到抑制檢測線(xiàn)顯色的效果。將試紙條插入混合液中,液體沿試紙條垂直向上層析并層析至檢測區(檢測區內有控制線(xiàn)和檢測線(xiàn))。測試有效時(shí),上方的控制線(xiàn)會(huì )顯色。檢測線(xiàn)的顏色深淺與樣品中DON濃度成反比。通過(guò)使用?S-Flow?軟件及對稱(chēng)定量技術(shù)可以準確測定DON的濃度。




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