• <tt id="yyyyy"></tt>
  • 您好,歡迎來(lái)到北京陸橋技術(shù)股份有限公司官網(wǎng)!
    服務(wù)熱線(xiàn): 400-810-1304

    空腸彎曲菌的活化與保藏

    發(fā)布時(shí)間: 2021-03-26

    空腸彎曲菌(Campylobacter jejuni)是一種可以引起人類(lèi)急性腸炎和食物中毒的人畜共患病原菌。該菌培養條件苛刻,生長(cháng)需要特定的環(huán)境,菌株不易保存。通常在微需氧(5%氧氣、85%氮氣、10%二氧化碳)、42±1℃環(huán)境下,可存活4~5d,最后因培養基表面干燥而導致菌體干燥死亡。


    空腸彎曲菌的活化與保藏


    一、空腸彎曲菌的活化方法


    1.配制彎曲菌活化肉湯


    空腸彎曲菌的活化與保藏


    a. 將各成分溶于蒸餾水中,經(jīng)過(guò)0.22μm濾膜過(guò)濾除菌。FBP 根據需要量現用現配,在-70℃儲存不超過(guò)3個(gè)月或-20℃儲存不超過(guò)1個(gè)月。


    b. 裂解脫纖維羊血提前從-70℃冰箱取出恢復至室溫。


    c. 稱(chēng)取CM125布氏肉湯并溶解滅菌,滅菌后冷卻至室溫。每100ml基礎加入5ml裂解脫纖維羊血和0.5ml FBP溶液,分裝試管,即制備完成。

    空腸彎曲菌的活化與保藏


    2.肉湯培養

    從-70℃冰箱取出彎曲菌凍存甘油管,傾倒至彎曲菌活化肉湯中。置于厭氧培養罐中,加入微需氧產(chǎn)氣袋于42℃培養24h。


    3.平板培養

    取10ul肉湯培養物劃線(xiàn)至哥倫比亞血平板(PB003A),42℃微需氧培養44±4h,觀(guān)察菌落形態(tài)。典型菌落為灰色、扁平、濕潤有光澤,呈沿接種線(xiàn)向外擴散的傾向。

    空腸彎曲菌的活化與保藏


    4、菌株驗證

    通過(guò)菌落形態(tài)和生化實(shí)驗對菌株進(jìn)行驗證,確認后進(jìn)行菌株保藏。

    ?

    二、空腸彎曲菌的保藏方法


    1.雙倍布氏肉湯甘油保存管制作:稱(chēng)取5.62g CM125布氏肉湯干粉,溶于70ml蒸餾水、30ml甘油中,滅菌后冷卻至室溫,加入5ml裂解脫纖維羊血、0.5ml FBP溶液,混勻后分裝到凍存管中,每管1ml。


    空腸彎曲菌的活化與保藏


    2.?使用接種環(huán)刮取哥倫比亞血平板上的純菌落(盡可能多)至凍存管中,渦旋震蕩5s,于-70℃長(cháng)期保存。



    三、注意事項


    01

    不建議使用磁珠管保藏彎曲菌,存活率不如甘油凍存管。

    02

    -20℃保存的效果不如-70℃冰箱,如果使用-20℃保存,應半年進(jìn)行一次傳代。

    03

    如果短期保存,可將厭氧罐同試管/平板放入2-8℃冰箱,一星期內使用。



    空腸彎曲菌的活化與保藏

    MSS樣本管理系統掃碼裝置及專(zhuān)用凍存管


    空腸彎曲菌的活化與保藏

    MSS樣本管理系統軟件展示



    參考文獻:

    1.??????? 陳晶晶.彎曲菌腸炎[J].中華流行病學(xué)雜志, 1986, 7 (4) :245-249

    2.??????? 欒軍, 祝長(cháng)青, 蔣原, et al..空腸彎曲菌保存方法的比較[J].口岸衛生控制, 2006, 12(4):15-17.

    3.??????? 欒軍, 祝長(cháng)青, 蔣原, et al. 空腸彎曲菌選擇性增菌培養和分離方法的比較[J]. 中國人獸共患病學(xué)報, 2008, 24(002):117-119.

    4.??????? GB4789.9-2014 食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 空腸彎曲菌檢驗[S].




    相關(guān)內容 RELATED CONTENT

    陸橋官方公眾號

    聯(lián)系我們
    北京陸橋技術(shù)股份有限公司
    地址:燕郊經(jīng)濟技術(shù)開(kāi)發(fā)區東外環(huán)路陸橋公司
    電話(huà):400-810-1304,010-51203999
    郵箱:info@beijinglandbridge.com
    陸橋服務(wù)
    服務(wù)熱線(xiàn)
    400-810-1304
    技術(shù)支持
    010-85786931
    Copyright ?2020-2025 北京陸橋技術(shù)股份有限公司
    犀牛云提供企業(yè)云服務(wù)
    91香蕉高清国产线观看免费|色综合热无码热国产|久久99热只有频精品|天堂久久久亚洲国产一区