經(jīng)過(guò)上期的介紹，相信大家對沙門(mén)氏菌已經(jīng)有了基本了解。

從本期開(kāi)始，我們進(jìn)入選擇分離平板。

選擇分離是最考驗檢驗員的步驟，也是干擾菌最?lèi)?ài)逞威風(fēng)的地方。

莫怕莫怕，陸橋助你斬妖除魔！

前方高能，海量照片來(lái)襲！

將培養后的TTB和SC搖勻，用接種環(huán)分別劃線(xiàn)接種于BS瓊脂平板和XLD瓊脂平板，或HE瓊脂平板，或沙門(mén)顯色平板，于36℃±1℃分別培養40h-48h或18h-24h，之后觀(guān)察各個(gè)平板上菌落特征。單菌落的菌落特征最為典型，利于觀(guān)察，為獲得大量單菌落，一般建議采用分區劃線(xiàn)。

? ? 菌落特征的觀(guān)察和選取對試驗人員的經(jīng)驗要求較高，為幫助各位試驗人員更好的檢出沙門(mén)氏菌，我們將四種平板上常見(jiàn)菌落特征介紹如下：

BS瓊脂是沙門(mén)氏菌檢驗中的必用平板，它的優(yōu)勢在于對傷寒沙門(mén)氏菌（S. Typhi）的檢出率比傳統平板高30-80%不等，特別是臨床檢驗中。同時(shí)在沙門(mén)顯色培養基出現之前，對變形菌的抑制性和特異性均好于同類(lèi)培養基。所以BS瓊脂一直是沙門(mén)氏菌選擇分離的首選培養基。

BS瓊脂的主要成分是亞硫酸鉍，但是成分表中也沒(méi)有此成分，這點(diǎn)與TTB類(lèi)似。亞硫酸鉍由亞硫酸鈉和檸檬酸鉍銨在加熱過(guò)程中反應生成，亞硫酸鉍和煌綠能互補的抑制大腸桿菌、變形桿菌和革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(cháng)，但是對傷寒、副傷寒等沙門(mén)氏菌的生長(cháng)沒(méi)有影響。具體可參考陸橋官網(wǎng)亞硫酸鉍瓊脂（BS瓊脂）。

培養基配制時(shí)不需要高壓滅菌，不宜過(guò)度加熱。建議當天制備，第二天使用，超過(guò)48h會(huì )降低選擇性。

國標上描寫(xiě)的BS瓊脂上沙門(mén)氏菌菌落特征是：菌落為黑色有金屬光澤、棕褐色或灰色，菌落周?chē)囵B基可呈黑色或棕色；有些菌株形成灰綠色的菌落，周?chē)囵B基不變。

其中前半段描寫(xiě)的是典型沙門(mén)氏菌菌落形態(tài)，后半段是非典型沙門(mén)氏菌的菌落形態(tài)。下面我們會(huì )給大家展示一些實(shí)例，幫助大家在檢驗中分辨沙門(mén)氏菌。

1.1.1?典型的沙門(mén)氏菌

菌落為黑色有金屬光澤、棕褐色或灰色，菌落周?chē)囵B基可呈黑色或棕色。

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1.1.3?非典型沙門(mén)氏菌形態(tài)的干擾菌

從上述菌落特征可以發(fā)現，傷寒沙門(mén)氏菌在BS瓊脂上是典型特征，利于提高檢出率。而常見(jiàn)干擾菌奇異變形桿菌為非典型菌落，大腸類(lèi)菌受一定抑制，且特征屬于非典型。這都利于排除非沙門(mén)氏菌的干擾。但BS瓊脂也不是完美的，有些常見(jiàn)沙門(mén)氏菌也為非典型特征，需要我們挑取菌落時(shí)，優(yōu)先挑取典型菌落，兼顧非典型菌落。同時(shí)還需要其他培養基（XLD、HE或沙門(mén)顯色培養基）協(xié)同進(jìn)行檢驗，避免漏檢。

XLD瓊脂的配方設計非常巧妙，目的是為了分離沙門(mén)氏菌和志賀氏菌。第一個(gè)巧妙之處是添加了木糖，腸道細菌幾乎都可以利用木糖，只有志賀不利用。所以志賀是無(wú)色的菌落。第二個(gè)巧妙是添加了賴(lài)氨酸，沙門(mén)氏菌也能利用木糖產(chǎn)酸，這樣就不能與其他腸道菌區分開(kāi)，但是大部分沙門(mén)會(huì )產(chǎn)賴(lài)氨酸脫羧酶，在酸性條件下把賴(lài)氨酸脫羧后形成的尸胺是堿性，會(huì )中和木糖產(chǎn)的酸，從而使菌落保持無(wú)色。再配合硫化氫指示系統，沙門(mén)就變成了我們看到的形態(tài)。乳糖和蔗糖的存在可以讓產(chǎn)生賴(lài)氨酸脫羧酶的大腸菌群大量產(chǎn)酸，從而與沙門(mén)氏菌區分。具體原理可以參考陸橋官網(wǎng)木糖賴(lài)氨酸脫氧膽鹽瓊脂（XLD瓊脂）。

培養基配制時(shí)不需要高壓滅菌，不宜過(guò)度加熱。建議當天制備，第二天使用。

國標上描寫(xiě)的XLD瓊脂上沙門(mén)氏菌菌落特征是：菌落呈粉紅色，帶或不帶黑色中心，有些菌株可呈現大的帶光澤的黑色中心，或呈現全部黑色的菌落；有些菌株為黃色菌落，帶或不帶黑色中心。

前半段是典型沙門(mén)氏菌的菌落特征，包括了兩種主要的形態(tài)。后半段是非典型沙門(mén)氏菌的菌落特征。下面還是給大家展示一些實(shí)例，幫助大家在檢驗中分辨沙門(mén)氏菌。

1.2.1?典型的沙門(mén)氏菌

1.2.2?典型沙門(mén)氏菌形態(tài)的干擾菌

1.2.3?非典型的沙門(mén)氏菌

1.2.4?非典型沙門(mén)氏菌形態(tài)的干擾菌

從上述菌落特征可以發(fā)現，傷寒沙門(mén)氏菌在XLD瓊脂上并不是最典型的，所以體現了BS瓊脂的重要性。腸炎沙門(mén)氏菌在XLD瓊脂上是最典型特征，彌補了BS瓊脂上漏檢的可能性。但是奇異變形桿菌和志賀氏菌的干擾也會(huì )很明顯。非典型的沙門(mén)氏菌菌落只有少數能發(fā)酵乳糖的亞利桑那菌才能形成，而日常檢驗中看到的黃色菌落更多的是大腸類(lèi)的菌。一旦看到黃色菌落，也只能挑取，通過(guò)生化試驗進(jìn)行區分。

本期介紹了BS瓊脂和XLD瓊脂，下期除了HE瓊脂和沙門(mén)顯色外，還會(huì )帶來(lái)平板的匯總，敬請期待。。。。