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    GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項

    發(fā)布時(shí)間: 2022-02-23

    《GB 29921-2021預包裝食品中致病菌限量》于2021年11月22日實(shí)施,其中,肉制品和即食果蔬制品中致病菌指標變化較大,刪除了大腸埃希氏菌O157:H7/NM,新增加了致瀉大腸埃希氏菌項目,引起了廣大檢驗同行的關(guān)注!

    GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項


    對于沒(méi)接觸過(guò)這個(gè)標準的小伙伴們來(lái)說(shuō),致瀉大腸埃希氏菌聽(tīng)起來(lái)比較陌生,那就跟隨小編來(lái)一起了解下這個(gè)標準吧!


    致瀉大腸埃希氏菌簡(jiǎn)介


    致瀉大腸埃希氏菌(Diarrheogenic?E. coli,DEC),是一類(lèi)能引起人體以腹瀉癥狀為主的大腸埃希氏菌,可經(jīng)過(guò)污染食物引起人類(lèi)發(fā)病。常見(jiàn)的致瀉大腸埃希氏菌主要包括腸道致病性大腸埃希氏菌EPEC、腸道侵襲性大腸埃希氏菌EIEC、產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌ETEC、產(chǎn)志賀毒素大腸埃希氏菌STEC(包括腸道出血性大腸埃希氏菌EHEC)和腸道集聚性大腸埃希氏菌EAEC。


    GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項


    致瀉大腸埃希氏菌檢驗程序

    GB4789.6-2016


    選擇性增菌


    樣品經(jīng)營(yíng)養肉湯增菌后轉接到腸道菌增菌肉湯中。

    ? 注意

    1、營(yíng)養肉湯增菌時(shí)間為6h,時(shí)間過(guò)長(cháng)會(huì )增加非目標菌的數量;


    2、腸道菌增菌肉湯的培養溫度為42℃,有助于抑制非腸道菌生長(cháng)。


    GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項

    五種致瀉大腸埃希氏菌及大腸埃希氏菌在腸道菌增菌肉湯中生長(cháng)情況



    選擇性分離



    將增菌液劃線(xiàn)接種MAC和EMB瓊脂平板,于36℃ ± 1℃培養18h~24h,觀(guān)察菌落特征:

    在MAC瓊脂平板上,分解乳糖的典型菌落為磚紅色至桃紅色,不分解乳糖的菌落為無(wú)色或淡粉色;

    GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項


    在EMB瓊脂平板上,分解乳糖的典型菌落為中心紫黑色帶或不帶金屬光澤,不分解乳糖的菌落為無(wú)色或淡粉色。

    GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項






    生化鑒定




    GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項

    GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項

    DBI-09?致瀉大腸埃希氏菌干制生化鑒定試劑盒



    五種致瀉大腸埃希氏菌與大腸埃希氏菌生化反應一致,無(wú)法區分,需要通過(guò)PCR進(jìn)行進(jìn)一步確認。


    PCR確認實(shí)驗


    GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項

    MX-2101?五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測試劑盒

    GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項

    陸橋五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測試劑盒操作流程示意圖




    GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項

    五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測瓊脂糖凝膠電泳


    GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項

    五種致瀉大腸埃希氏菌目標條帶與型別對照表(GB4789.6-2016



    根據瓊脂糖凝膠電泳中樣品DNA的擴增條帶大小,與GB 4789.6-2016中表5(如上)進(jìn)行對照,作為最終的結果進(jìn)行報告。每次PCR反應使用 EPEC、EIEC、ETEC、EHEC、EAEC標準菌株作為陽(yáng)性對照。




    MX-2101?五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測試劑盒


    北京陸橋的五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測試劑盒采用多重PCR技術(shù),適用于五種致瀉大腸埃希氏菌的體外核酸檢測:

    01

    每個(gè)反應體系均含有大腸埃希氏菌種屬鑒定和毒力基因檢測的十二對特異性引物,一次反應即能鑒定五種致瀉大腸埃希氏菌的型別;

    02

    采用國際先進(jìn)的預混凍干技術(shù),既簡(jiǎn)化了操作(兩步即可上機),又能使產(chǎn)品可以常溫或冷藏運輸,且保持Taq酶較高的酶活性,極大的方便了客戶(hù)的檢測工作。



    檢驗產(chǎn)品列表


    GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗及注意事項

    相關(guān)產(chǎn)品詳情可點(diǎn)擊以下查詢(xún):


    CM142?營(yíng)養肉湯(不含糖)


    CM144?腸道菌增菌肉湯(EE)


    CM908B?麥康凱瓊脂?


    CM105?伊紅美藍瓊脂(EMB)


    DBI-09?致瀉大腸埃希氏菌干制生化鑒定試劑盒?


    MX-2101?五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測試劑盒?




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