生物素又稱(chēng)維生素H、輔酶R,是水溶性維生素,也屬于維生素B族,B7。它是合成維生素C的必要物質(zhì),是脂肪和蛋白質(zhì)正常代謝不可或缺的物質(zhì)。是一種維持人體自然生長(cháng)、發(fā)育和正常人體機能健康必要的營(yíng)養素。
生物素在中等強度的酸及中性溶液中可穩定數日,在堿性溶液中穩定性較差。在普通溫度下相當穩定,但高溫和氧化劑可使其喪失活性。
生物素檢測依據的標準是GB 5009.259-2016《食品安全國家標準 食品中生物素的測定》。其中,微生物檢測方法是根據植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)的生長(cháng)與待測試樣中生物素的含量呈線(xiàn)性關(guān)系的原理,試樣透光率與標準工作曲線(xiàn)進(jìn)行比較, 得出待測試樣中生物素的具體含量。
陸橋公司可提供符合標準的多種形式的檢測試劑,包括傳統的干粉型生物素測定培養基(CM1407),即用型的生物素國標即用型套裝(GVT1003)以及生物素檢測試劑盒(VT3103)。

不同產(chǎn)品在標準方法中的具體應用匯總見(jiàn)表1。
表1 ?不同產(chǎn)品在標準方法中的應用比對表

生物素檢測試劑盒中的菌球采用先進(jìn)技術(shù),將其預包埋在凍干保護劑中,使用時(shí)將其完全溶解于培養基中,保證活性的同時(shí)也可保證實(shí)驗結果的穩定性。
生物素檢測產(chǎn)品比對
為了探求國標即用型套裝和檢測試劑盒兩種形式的產(chǎn)品,對于同一樣品檢測結果的準確性,我們選擇了標準質(zhì)控樣、標準樣品奶粉進(jìn)行了比對實(shí)驗,并進(jìn)行了加標回收驗證實(shí)驗。
? ? ? ?國標即用型套裝和檢測試劑盒的標準曲線(xiàn)結果見(jiàn)圖1~圖2,不同質(zhì)控樣品比對和加標回收實(shí)驗結果見(jiàn)表2。

圖1 生物素檢測試劑盒標準曲線(xiàn)

圖2 生物素國標即用型標準曲線(xiàn)
表2 ?樣品比對和加標回收實(shí)驗結果匯總表

比對實(shí)驗結果表明:
1)兩種實(shí)驗方法,生物素含量與吸光度值均呈相關(guān)度非常高的線(xiàn)性關(guān)系,線(xiàn)性相關(guān)系數R2?均在0.99以上;
2)每個(gè)梯度的平行之間誤差范圍在10%以?xún)?,兩種產(chǎn)品對同一樣品的檢測結果標準偏差小于5%;
3)標準質(zhì)控樣及標準樣品的測定結果均落在滿(mǎn)意值范圍內,且加標回收率均在90-110%。?
因此,生物素國標即用型套裝和生物素檢測試劑盒兩種產(chǎn)品均可用于樣品中生物素的測定。
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????在生物素檢測過(guò)程中,我們還有幾個(gè)方面需要注意:
?1、生物素容易與抗生素因子結合,且油脂會(huì )促進(jìn)植物乳桿菌的生長(cháng),因此實(shí)驗用到的所有玻璃器皿必需嚴格處理,清洗干凈后再于180℃烘烤2h,從而去除殘留的微量生長(cháng)因子。
2、國標法樣品處理時(shí),需要NaOH調pH,回調pH值時(shí)需要使用H2SO4,不得用HCl,因為HCl能使生物素失去活性。
食品中生物素檢測產(chǎn)品列表
